本文標題："生物專題-培養細胞或細胞離心機概述！"
發布者：yiyi ------ 分類: 站內動態 ------ 人瀏覽過 -----時間：2012-10-29 23:30:40
培養細胞或細胞離心機
概覽
Calbiochem的單株和多株抗體可以在經過固定的培養細胞中用來進行抗原的定位。備注: 細胞離心機Cytospins®可以采用福馬林固定(formalin-fixed)和石臘包埋(paraffin-embedded)兩種型式, 然后在使用上述的石臘切片進行預處理和染色。
必要的溶液和試劑:
細胞: 位于蓋玻片上
PBS (磷酸鹽生理食鹽水緩衝液): 將8 g NaCl、0.2 g KCl、1.44 g Na2HPO4和0.24 g KH2PO4溶于800 mL蒸餾水中。使用HCl將pH值調整為7.4。加入蒸餾水使溶液成為1公升。
希望使用的固定劑如下: 1%福馬林、100%甲醇或100%丙酮。
步驟: 載玻片制備
將培養細胞置于殺菌蓋玻片或載玻片(例如chamber slide), 并于37°C條件下隔夜生長。
使用PBS稍微潤洗。
如下列可能步驟進行固定(只需要使用其中之一):
在PBS中 (需保持濕潤)使用1 %福馬林固定10分鐘。
在-10°C條件下使用甲醇固定5分鐘然后風亁。
使用冷的丙酮固定5分鐘然后風亁。
免疫過氧化酶染色法
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